Praktické lékárenství – 2E/2021

www.praktickelekarenstvi.cz / Prakt. lékáren. 2021; 17(e2): e32–e37 / PRAKTICKÉ LÉKÁRENSTVÍ e34 NEMOCNIČNÍ LÉKÁRENSTVÍ Stanovení bakterií rodu Ralstonia v čištěné vodě (Aqua purificata) líku (méně než 10µg/l) došlo k významnému pomnožení R. picketii , a to v biofilmech, nikoliv ve formě planktonní – tj. volné (6). Během 48 hodin se počty R. picketii zvýšily z hodnoty ≤10 KTJ/ml na 2,2*10 5 KTJ/ml s tím, že tyto bakterie musely využívat i přítomný PVC-C jako zdroj uhlíku. Cílem této práce bylo zjistit výskyt bakterií rodu Ralstonia v různých výrobnících čištěné vody a ověřit, zda se zde nacházejí i v případech, kdy celkové počty aerobních mikroorganismů splňují požadavky Českého lé- kopisu (3). Zároveň jsme chtěli ukázat na možné rozdíly ve způsobech de- tekce aerobních organotrofních mikroorganismů (různá média, různý typ inokulace apod.). Metodika Odběr vzorků byl prováděn z pěti různých výrobníků čištěné vody ve zdravotnických zařízeních s tím, že nejprve byl odebrán „první podíl“, tj. vzorek bez odtočení (100–300ml, doba stagnace pokud možno 12 hodin), poté bylo provedeno odtočení 2–3 litrů a následně byl odebrán vlastní vzorek čištěné vody (100–300ml). Vzorky byly ihned za stálého chlazení transportovány do laboratoře a analyzovány do 4 hodin po odběru. Celkem bylo analyzováno 42 vzorků. Vzorky byly inokulovány jak přímým výsevem na povrch agarového média, tak membránovou filtrací na filtrech o porozitách 0,22 a 0,45µm. Byla použita tři živná média o různém obsahu živin, a to R2A (Himedia) předepsaný Českým lékopisem (3), o něco více úživný tryptózový agar s kvasničným extraktem TYA (Himedia) předepsaný normou ČSN EN ISO 6 222 a vysoce živný krevní agar (Columbia agar, Oxoid). Kultivace pro- bíhala 5–6 dní při 30 °C. Následně byl spočítán celkový počet aerobních bakterií. Nejistota stanovení počtu kolonií se pohybuje okolo 35%. Vybrané kolonie byly dále identifikovány metodou MALDI – TOF (matrix assisted laser desorption/ionization) na přístroji Bruker Daltonic MALDI Biotyper. Na základě těchto výsledků byl určen vzhled (tvar, velikost, zbarvení) kolonií rodu Ralstonia (R. picketii/ R. indisiosa) . Tyto kolonie (tzv. „presump- Obr. 1. Růst kolonií na R2A agaru. Ralstonie rostou jako větší matné krémové kolonie (šipka) TANOVENÍ BAKTERIÍ RODU ALSTONIA V ČIŠTĚNÉ VODĚ QUA PURIFICATA